Cellulose DE-32 DEAE 纤维素 DE-32

Cellulose DE-32 DEAE 纤维素 DE-32

产品信息：

中文名称：DEAE纤维素DE-32

英文名称：DEAE cellulose DE-32；DEAE-Cellulose microgranular

其他名称：二乙氨基乙基纤维素32；2-(二乙氨基)乙迷纤维素32

CAS号：9013-34-7

级别：柱层析

功能团：二乙氨乙基

正常PH范围：2～9.5 

小离子电量：0.88～1.08meg/dg(dg=dry gram，千克重) 

蛋白容积：700mg/dg（蛋白体积是指0.01M ph8.5磷酸缓冲液—牛血清白蛋白）

蛋白容积/柱体积：140mg/ml

每升所需的离子交换剂㎏柱床体积：0.24（离子交换剂重量的数字考虑到溶胀，容易去除及使用过程中离子离子交换剩余颗粒）

填料密度：0.20dg/ml（填料密度的状态为0.05M PH7.5磷酸缓冲液）

性状(以下信息仅供参考)：白色或微黄色颗粒状或纤维状。为中等碱度阴离子交换剂。对高相对分子质量聚合电解质有较好的解析。游离碱型。典型吸收值 (胰岛素相对分子质量12000)850mg/g、(牛血清蛋白)660mg/g。

用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)用于柱色谱分析，用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等，阴离子交换填料

Cellulose DE-32 DEAE 纤维素 DE-32   

层析柱装填

1. 吸附性层析一般建议装填高度为 10~15cm 高，分子筛建议装填高度为60~90cm

1）组装柱（如有需要连接装柱器）。

2）取下下柱头用装柱缓冲液冲洗柱底适配器，排除筛网下面的气泡，将下柱头安装

在层析柱底部，旋紧调整旋钮，并在层析柱底部保留 1cm 左右高度的液体。

3）用装柱缓冲液重悬介质，制成 50%~75%左右的介质悬浮液。

4）一次性将介质倒入柱管中，避免产生气泡。

5）如连接有装柱器，立即往装柱器中缓慢加入装柱缓冲液。将适配器或装柱器上盖

与层析系统相连接。

6）设定所需流速⁺，打开柱下端，启动泵，进行压柱。

7）柱床稳定后保持 30min 以上，关闭泵和底阀。

8）如连接有装柱器，移除装柱器后连接适配器。

9）调节适配器，使其固定在胶面上 0.5~1cm 处，并保证适配器入口充满液体。

10）打开底阀，连接泵，继续用设定的流速（注意压力不要超过 0.3Mpa）继续压柱

待胶面高度保持不变，标记此时胶面高度

11）暂停机器，关闭底阀，断开柱头入口，调低适配器至胶面下 3~5mm 处。封闭

上柱口，装柱完成。

6、柱效测定

装填好的层析柱可以通过测柱效的方式来评价装柱效果。

• 柱效测定可以采用丙酮作为指示剂也可以采用NaCl作为指示剂，按照下表配

• 计算柱效：

根据UV或者电导率曲线计算理论踏板高度（HETP）、理论塔板数（N）和非对

称因子（As），公式如下：

HETP=L/N

N=5.54(VR/Wh)²

其中：VR=保留体积

Wh=半高峰宽

L=柱高

N=理论塔板数

VR和Wh的单位应*；

As=b/a

其中：

a=  在10%峰高处的*个半

b=  在10%峰高处的第二个半

结果评价

由以上公式计算出的 HETP 的数值若小于三倍介质平均颗粒大小 且非对称因子在 0.8~1.8 则判定为层析柱状态良好。对于不理想的 柱效需要分析原因甚至需要重新装填层析柱。