液相色谱柱的性能直接关系到分离分析的准确性与适用性

　　液相色谱仪由高压液体泵分离系统、检测器及液相色谱柱(含柱温控制系统)等三部分组成。其中液相色谱柱是液相色谱工作的关键，液相色谱柱的性能直接关系到分离分析的准确性与适用性。
 

　　液相色谱柱的分类方法很多，可按键合相类型、用途(分析型与制备型)、基质种类等进行分类。
 

　　1 、硅胶基质柱(4大类)
 

　　目前，分析型液相色谱柱多为硅胶基质柱，细分为：
 

　　高纯硅胶柱：以高纯度硅烷化硅胶(Silica)为填料，应用范围较广，但只能在PH2.0-7.5，小于60度的条件下使用。又由于强极性硅羟基(Si-OH)的次级保留效应较强，所以应用受到局限，已被键合相柱所取代。
 

　　反相硅胶柱：是以硅烷化硅胶为基质，表面键合弱极性官能团的固定相。目前多用C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(phenyl，苯基)等。用于分离大多数有机化合物，应用范围广。
 

　　正相硅胶柱：是以硅烷化硅胶为基质，表面键合极性官能团的固定相。目前较多的为：NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL(二羟基，也常做HILIC单独分类列出，多用于分离有机酸、蛋白质等)。多用于分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。
 

　　离子交换柱：是以硅烷化硅胶为基质，以磺化交联键合强阳/阴离子基团(磺酸盐/季铵碱)的固定相，又分为强酸性、强碱性、弱酸性、弱碱性等不同规格。用于分离解离性较强的有机盐类化合物。(注意：不要同离子色谱混淆，离子色谱主要是分离无机盐类化合物或某些带点离子。)
 

　　2、聚合物基质柱
 

　　聚合物基质柱是指采用聚苯乙烯—二乙烯基苯、聚甲基丙烯酸脂、多孔性微球蛋白等聚合物凝胶作为主要填料的一类色谱柱。其相对于硅胶柱具有更强的疏水性及更宽泛的pH范围(1.0～14.0)，但柱效较低，目前主要应用于凝胶渗透色谱(GPC)、凝胶过滤色谱(GFC)及分子排阻色谱(MEC)。主要用于分离蛋白质类等大分子化合物。
 

　　3、其他无机物填料柱
 

　　这类色谱柱于特殊用途，主要有石墨化碳、氧化铝(Al2O3)、氧化锆(ZrO2)等填料。不需要进行表面改性，其自身表面即可对各类化合物有强保留。可在任意pH(氧化铝除外，不能大于12.0)及高温度(可达100℃)下使用。其中，石墨化碳填料柱能分离多种化合物，主要用于分离几何异构体;氧化铝柱刚性强，柱床稳定，可分离多种化合物且多用于制备色谱;氧化锆柱较氧化铝柱有更强的pH适用范围及能耐受更高的温度，但其应用尚待进一步研究。