乳制品牛乳中乳糖含量测定分析

1. 介绍

乳糖是儿童生长发育的主要营养物质之一，对青少年智力发育十分重要，特别是新生婴儿*的，在自然界中只有哺乳类动物的奶中含有乳糖，各类植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促进脑苷脂类和黏多糖类的生成，因而对幼儿智力发育非常重要。乳制品企业通常通过测定牛乳中半乳糖的含量来计算牛乳中乳糖的含量。

2. 实验

设备：

ELSD3300蒸发光散射检测器

Agilent 1260 HPLC，C.01.07

试剂及耗材：

流动相A：超纯水

流动相B：色谱纯乙腈

色谱柱：Beksich糖柱，4.6*250mm,5um

（货号：Bek445101）

柱温箱温度：

30C

样品：

牛乳样品提取物

样品预处理: 

样品经蛋白沉淀后，0.45um滤膜过滤后取上清液待上样

进样体积:

20ul

按78%乙腈：22%水等梯度比例进行检测，运行时间为20min

流动相流速：

0.9ml/min

样品检测：

样品配置好后置于自动进样器中，使用编辑好的方法进行自动进样分析

3. 结果

 ELSD3300蒸发光散射检测器测定牛乳中乳糖含量

结果见表1。

表 1：乳糖定量检测，*个峰为半乳糖

表2：半乳糖和葡萄糖分离度及拖尾因子情况

表 3：半乳糖定量曲线

 R=0.99903

本次实验的难点是样品没有紫外吸收，样品水溶性强，需用乙腈稀释，半乳糖和葡萄糖不易达到基线分离。且ELSD3300运行参数如气体流速和检测温度以及增益值必须优化。

4. 结论

本方法使用ELSD3300测定了牛乳中半乳糖的含量，半乳糖和葡萄糖实现了基线分离，ELSD3300有平衡时间短，基线噪音小，重现性高和线性好等特点。