一、Vision色谱柱在线速度相同的情况下,管径越大需要的流速越大,消耗溶剂越多。
F1/D1²=F2/D2²
使用小管径色谱柱可以节约溶剂。
由公式F=(3πD²u)/20 得消耗溶剂只差F1-F2=(D1²-D2²)3π u/20
例如:当线速度u=0.1cm/s时,使用管径D=2.1mm.的色谱柱比使用D=4.6mm的色谱柱,节约溶剂79%。
所以,方法优化时使用小管径色谱柱既有利于节约溶剂和减小载样量。
二、不同柱径色谱柱流动相的*流速
对于不同粒径的色谱柱,特别是大粒径色谱柱(粒径大于3um)线速度u=0.1cm/s时,对应的流动相的流速F为*流速。
根据公式 U=(20F)/(3πD²)
式中:线速度u:cm/s,流速F:ml/min,色谱柱柱径D:mm。
色谱柱柱径D=4.6 mm的柱子,当线速度u=0.1 cm/s时,*流速F=1ml/min
色谱柱柱径D=4.0mm的柱子。当线速度u=0.1cm/s时。*流速F≈0.8ml/ming
三、Vision色谱柱线速度相同,分析时间与柱长成正比
u=L/t 式中:u——线速度,L——柱长,t——分析时间,
A:线速度U相同【流速F相同,管径D相同】,柱效N不同【柱长L不同,粒径d不同】,洗脱液,柱温,进样量相同
结论:分析时间t不同,分离度R不同,分析时间t与柱长L成正比。
B:线速度U相同【流速F不同,管径D不同】,柱效N相同【柱长L相同,粒径d相同】,洗脱液,柱温相同。
结论:分析时间t相同,分离度R相同,进样量与柱容量成正比。
C:柱容量公式:V=π *r²*L*60%
式中:r——柱半径cm,L——柱长cm,60%——柱空穴率。
四、Vision色谱柱如何比较柱效
式中:N——柱效,L——色谱柱长,
——粒径
对于同种填料不同管径粒径的色谱柱,柱效N与柱长L成正比,与粒径成反比,柱长L与粒径之比相同的色谱柱柱效N相同,在方法优化的时候小粒径短柱和比值相同的大粒径长柱有着同样的柱效。
五、Vision色谱柱柱前压
减小粒径和柱径,减小扩散增加柱效,同时减小流速和柱长,降低柱压,以便于适应色谱系统,由于色谱柱管径的缩小,粒径的减小也会对系统带来不利的影响,在分析允许的条件下,升高柱温,降低流动相的粘度,以缓解系统压力,提高流动相的流量,缩短分析时间。
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